|
教授 |
定 清直 |
平成１８年１０月 〜 |
|
教授 |
木村 吉延 |
昭和５６年４月 〜 平成１８年３月 |
|
助教授 |
後藤 敏 |
平成 ６年４月 〜 平成１８年３月 |
|
助手 |
小松 孝行 |
平成元年１０月 〜 |
|
助手 |
竹内 健司 |
平成 ３年４月 〜 |
アダプター蛋白質3BP2の生理的・病理的役割、およびHCV感染のシグナル伝達機構についての研究
● 研究概要
当領域では2006年3月に木村吉延教授と後藤敏助教授が退官し、同年10月に定が後任教授として神戸大学より着任し新しいスタートを切った。2007年2月には羽溪助手が新たに加わる予定である。
当研究室の主要な研究テーマは、細胞内シグナル伝達、特にアダプター蛋白質に関するものである。
1. アダプター蛋白質3BP2の生理的・病理的役割についての研究
シグナル伝達分子は、生体の維持や成長に不可欠な反応に関わり、特定かつ重要な役割を担っている。シグナル伝達分子の一種であるアダプター蛋白質は他の分子と会合するための機能ドメインを有するが、自らは酵素活性を持たないため、単なる「繋ぎ役」の分子とされこれまであまり重要視されなかった。われわれはアダプター蛋白質3BP2がより積極的にシグナル伝達を調節し、細胞応答に影響を与えていることを明らかにしてきた。アダプター蛋白質3BP2遺伝子の点突然変異はヒト遺伝疾患のケルビズム症を引き起こすことが報告され、また下顎骨の発達不全と精神遅滞を伴うWolf-Hirschhorn症候群や膀胱癌においても3BP2遺伝子が欠失する。われわれは、既にケルビズム型の3BP2が機能不全型を示すことなど興味深い知見を報告している。今後は、アダプター蛋白質3BP2の変異によるケルビズム症の発症と病態についての骨免疫学的解析や、3BP2と複合体を形成する受容体蛋白質についての機能解析を進めていきたいと考えている。
2. C型肝炎ウイルス感染によるシグナル伝達機構についての研究
C型肝炎ウイルス（HCV）は肝臓に慢性の炎症を起こし高率に肝細胞癌を引き起こすが、その分子機序については不明の点が多い。現在、HCV感染による宿主蛋白質の発現と機能、特に細胞内シグナル伝達機構への影響について網羅的に解析を進めている。
その他、木村前教授のRSウイルス感染による生体防御機構の研究や、後藤助教授のパラミクソウイルスによるインターフェロン抵抗性の研究が一部継続して行われた。また免疫学・寄生虫学の伊保助手との共同研究が行われた。
● キーワード
生化学一般, ウイルス学, 生体防御と免疫系一般, 細胞内シグナル伝達, アダプター蛋白質, Ｃ型肝炎ウイルス, インターフェロン, アレルギー
● 業績年の進捗状況
1. アダプター蛋白質3BP2の生理的・病理的役割についての研究
3BP2を介する生理作用と病理作用の解析に関する骨免疫系の新規実験系の立ち上げを行った。われわれはアダプター蛋白質についての研究の一分野として、アダプター様機能を有する蛋白質ユビキチンリガーゼ、特にCblについての研究に取り組んでおり、本年は理化学研究所と東京薬科大学との共同研究により、ミトコンドリアに発現する新規ユビキチンリガーゼを同定し、ミトコンドリア機能を制御することを報告した。
2. C型肝炎ウイルス感染によるシグナル伝達機構についての研究
HCVゲノム由来の蛋白質は多彩な病理作用を有する。本年は、HCVウイルス蛋白質NS3、NS4Aによる宿主蛋白質との会合と癌発症機構への影響について解析を行い、NS3と癌抑制遺伝子産物p53との会合の分子メカニズムと抑制機序や、NS4Aによるミトコンドリア機能への影響について報告を行った。最近、全ゲノムが自律増殖するHCV RNAレプリコン系やHCV感染系が確立され、慢性C型肝炎における癌発症機構の一つとして、癌抑制遺伝子産物である非受容体型チロシンキナーゼSykとの関係について調べたところ、SykがNS5Aに会合し、その活性を抑制することを明らかにした。HCV蛋白質の発現により肝細胞癌が発症するメカニズムの一つとして、チロシンキナーゼを介するシグナル伝達機構の破綻が考えられる（投稿中）。さらに慢性C型肝炎に合併する糖尿病の発症メカニズムについて解析し、HCVがGLUT2、GLUT1の細胞膜表面への発現抑制を介してグルコース取り込みを抑制することを見出した（投稿中）。公的研究費として，
科学研究費補助金・基盤研究（Ｃ）「Ｃ型肝炎ウイルス蛋白質による肝細胞の蛋白質チロシンリン酸化反応への影響」（研究代表者 定清直）を受けた。
● 特色等
1. われわれは、従来「繋ぎ役」として捉えられていたアダプター蛋白質による積極的な細胞応答の仕組みについて明らかにしてきた。3BP2がマスト細胞に発現し、IgEを介するアレルギー応答を正に制御することを見出した。また3BP2のノックアウトマウスの表現型が報告されるよりもかなり前に、siRNAを用いてリンパ球活性化シグナルにおける必然的な役割を明らかにした。これらの独創的な報告は2006年にCell誌やNature
Immunology誌、Annual Review of Immunology誌上で引用され、われわれの研究成果がアダプター蛋白質による細胞応答の制御機構の理解に強い影響を与えことを示している。現在アダプター蛋白質3BP2の研究では世界の最先端を走っていることを自負している。われわれの研究は、3BP2の遺伝子異常によるヒトの遺伝疾患ケルビズムの発症メカニズム解明、さらには関連する疾患の治療法開発など様々な発展性を有すると考えられる。
共同研究の成果として報告したミトコンドリアのユビキチンリガーゼについての研究は、非常に高い水準の雑誌に発表した（EMBO
JOurnal, IF: 10.086）。
2. 本年の発表論文のなかではHCVウイルス蛋白質による宿主蛋白質との相互作用と病原性、すなわち肝細胞癌発症メカニズムへの影響の解明が特筆される。従来、HCVの研究では自律してウイルス粒子が増殖できるシステムが世界で見つかっていなかったために、HCV
repliconシステムが代換システムとして用いられてきた。これはHCVゲノムを一部操作したRNAを細胞に導入すると、ゲノムが複製されるが、ウイルス粒子は産生されないシステムである。この仕組みと、各ウイルス蛋白質を個別に発現させる方法を併用することにより、これまで明らかにされてこなかったHCVの非構造蛋白質による癌抑制蛋白質p53の機能を抑制する効果と分子メカニズムを明らかにしたことは特筆に値する。さらにごく最近、全く新しいHCV感染実験系が登場し、われわれもいち早くそのシステムを導入して、これまで知られることのなかった蛋白質チロシンリン酸化反応への影響について生化学的見地から検討を加えていることも大きな特色である。HCVの病原性発現機構に関するこれらの研究成果はいずれも創薬の観点から発展性を有するものと位置付けられる。
● 本学の理念との関係
重点的研究分野のひとつである、免疫に関する高次生体システムの構築や維持についての分子メカニズムの解析について、われわれの持つ生化学とウイルス学という異なるバックグラウンドを生かし、他大学・研究所との共同研究を通じて、当該分野における世界水準の研究成果を挙げたと考えられる。今後は将来の研究を担う人材育成にも積極的に関わっていきたい。
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区 分 |
編 数 |
インパクトファクター (うち原著のみ) |
|||
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2001～2006年分 |
2006年分 |
2001～2006年分 |
2006年分 |
||
|
和文原著論文 |
0 |
0 |
――――― |
――――― |
|
|
英文論文 |
ﾌｧｰｽﾄｵｰｻｰ |
34 |
0 |
104.410 ( 104.410) |
0.000 ( 0.000) |
|
ｺﾚｽﾎﾟﾝﾃﾞｨﾝｸﾞｵｰｻｰ |
33 |
0 |
102.101 ( 102.101) |
0.000 ( 0.000) |
|
|
その他 |
7 |
7 |
26.396 ( 26.396) |
26.396 ( 26.396) |
|
|
合計 |
41 |
7 |
130.806 ( 130.806) |
26.396 ( 26.396) |
|
（A） 著書・論文等
(1)
英文：論文等
a．原著論文（審査有）
0622001
+M.Tanaka, +M.Nagano-Fujii, +L.Deng, +S.Ishido, K.Sada,
+H.Hotta: Single-point mutations of hepatitis C virus NS3 that impair
p53 interaction and anti-apoptotic activity of NS3. Biochem Biophys Res Commun,
340（3）, 792-799, 2006.02, #2.855
0622002
+L.Deng, +M.Nagano-Fujii, +M.Tanaka,
+Y.Nomura-Takigawa, +M.Ikeda, +N.Kato, K.Sada, +H.Hotta: The NS3 protein
of hepatitis C virus associates with the tumor suppressor p53 and inhibits its
function in an NS3 sequence-dependent manner. J Gen Virol, 87（6）,
1703-1713, 2006.06, #3.110
0622003
+H.Hotta, +K.Nihei, +Y.Abe, +S.Kato, +D.P.Jiang,
+M.Nagano-Fujii, K.Sada: Full-length sequence analysis of subacute sclerosing
panencephalitis (SSPE) virus, a mutant of measles virus, isolated from brain
tissues of a patient shortly after onset of SSPE. Microbiol Immunol, 50（7）, 525-534,
2006.07, #1.502
0622004
+Y.Nomura-Takigawa, +M.Nagano-Fujii, +L.Deng,
+S.Kitazawa, +S.Ishido, K.Sada, +H.Hotta: The nonstructural protein 4A
of hepatitis C virus accumulates on mitochondria and induces apoptotic cell
death through a mitochondria-mediated pathway. J Gen Virol, 87（7）,
1935-1945, 2006.07, #3.110
0622005
+M.Otaki, K.Sada, +H.Kadoya, +M.Nagano-Fujii, +H.Hotta:
Inhibition of measles virus and subacute sclerosing panencephalitis virus by
RNA interference. Antiviral Res, 70（3）, 105-111,
2006.07, #2.878
0622006
+R.Yonashiro, +S.Ishido, +S.Kyo, +T.Fukuda, +E.Goto,
+Y.Matsuki, +M.Ohmura-Hashimoto, K.Sada, +H.Hotta, +H.Yamamura, +R.Inatome, +S.Yanagi:
A novel mitochondria ubiquitin ligase plays a critical role in mitochondrial
dynamics. EMBO J, 25（15）, 3618-3626, 2006.08,
#10.086
0622007
+K.Tsuji-Naito, T.Hatani, +T.Okada, +T.Tehara: Evidence for
covalent lipoyl adduction with dopaquinone following tyrosinase-catalyzed
oxidation. Biochem Biophys Res Commun, 343（1）, 15-20,
2006, #2.855
(2)
和文：論文等
b．総説
(0522028)
定 清直: マスト細胞活性化シグナルを制御する分子. Molecular
Medicine, 42（10）, 1107-1112, 2005
(0522029)
定 清直: 肥満細胞におけるFcepsilonレセプターIからのシグナル伝達：3BP2とCbl-bによる肥満細胞活性化制御. 臨床免疫, 44（1）, 63-70,
2005
（B） 学会発表等
(1) 国際学会
a．一般講演（ポスター）
(0522030)
+Y.Nomura-Takigawa,
+H.Hotta, +M.Nagano-Fujii, +L.Deng, +S.Kitazawa, +S.Ishido, K.Sada: The
nonstructural protein 4A of hepatitis C virus accumulates on mitochondria and
induces apoptotic cell death through the mitochondria-mediated pathway, 12th
International Symposium on Hepatitis C Virus and Related Viruses, 2005,
Montréal(Canada), Abstract, 121, 2005
(0522031)
+M.Nagano-Fujii,
+S.Inubushi, +H.Mizuta, +M.Tanaka, +H.Yamamura, K.Sada, +K.Hotta: The
nonstructural protein 5A of hepatitis C virus associates with and negatively
regulates the enzymatic activity of non-receptor tyrosine kinase Syk in Huh-7
cells, 12th International Symposium on Hepatitis C Virus and Related Viruses,
2005, Montréal(Canada), Abstract, 132, 2005
0622008
+S.Inubushi,
+M.Nagano-Fujii, +C.An, +K.Kitayama, +H.Yokozaki, +H.Yamamura, +M.Ikeda,
+N.Kato, K.Sada, +H.Hotta: Hepatitis C virus NS5A protein associates with and
negatively regulates a non-receptor protein-tyrosine kinase Syk in Huh-7 cells,
The 20th IUBMB International Congress of Biochemistry and Molecular Biology,
2006.06, Kyoto(Japan), Abstract, 206, 2006
0622009
K.Takeuchi, T.Komatsu,
+B.Gotoh: Blockage of PKR activation in Sendai virus infected cells: Involvement
of the viral C gene, The 20th IUBMB International Congress of Biochemistry and
Molecular Biology, 2006.06, 京都市
0622010
+A.El-Shamy,
+M.Sasayama, +M.Nagano-Fujii, K.Sada, +S.R.Kim, +H.Hotta: A high degree of
sequence variation of HCV NS5A and the presence of anti-NS5A antibodies in the
pretreatment sera are associated with efficient viral clearance by combination
therapy using pegylated interferon and ribavirin, 13th International Symposium
on Hepatitis C Virus and Related Viruses, 2006.08, Sydney(Australia), Abstract,
63, 2006.08
0622011
K.Sada, +H.Yamamura,
+H.Hotta: Regulation of IgE-mediated mast cell activation by 3BP2 and Cbl-b.,
International symposium of
0622012
+S.Inubushi,
+M.Nagano-Fujii, +K.Kitayama, +H.Yamamura, K.Sada, +H.Hotta: Kinase activity of
the non-receptor tyrosine kinase Syk is down-regulated in Huh-7.5 cells
harboring an HCV RNA subgenomic replicon, 13th International Symposium on
Hepatitis C Virus and Related Viruses, 2006, Sydney(Australia), Abstract, 129,
2006
(2) 国内学会（全国レベル）
a．シンポジスト・パネリスト等
0622013
+堀田 博, +長野 基子, 定 清直: C型肝炎ウイルス非構造蛋白質NS3とNS4Aの細胞変性作用と細胞がん化への関与, 第10回日本肝臓学会大会・日本肝臓学会, 2006.10, 札幌, 講演要旨, A308,
2006
b．一般講演（口演）
(0522032)
+長野 基子, +犬伏 祥子, +田中 基文, +安 春英, +野村 亮太, +森田 加奈子, 定 清直, +堀田 博: C型肝炎ウイルスNS5Aは非受容体型チロシンキナーゼSykに会合しそのキナーゼ活性を負に制御する, 第53回日本ウイルス学会学術集会・日本ウイルス学会, 2005, 横浜, 抄録集, 198, 2005
0622014
+長野 基子, +Ahmed El
Shamy, +金 守良, +井本 勉, +婦木 秀一, +金 啓二, +谷口 美幸, 定 清直, +堀田 博: 慢性C型肝炎に対するペグインターフェロン/リバビリン併用療法の早期治療効果とC型肝炎ウイルスNS5AのV3領域アミノ酸配列多様性の相関について, 第42回日本肝臓学会総会・日本肝臓学会, 2006.05, 京都, 講演要旨, A116,
2006
0622015
+後藤敏, 小松 孝行, 竹内 健司, +北川善紀: ヒトメタニューモウイルスとインターフェロン抵抗能, 第54回日本ウイルス学会学術集会, 2006.11, 名古屋市
c．一般講演（ポスター）
(0522033)
+大瀧 桃子, +長野 基子, +角矢 博保, +加藤 誠一, +瀧川 有紀, 定 清直, +堀田 博: siRNAによるSSPEウイルス増殖抑制法開発の基礎的検討, 第53回日本ウイルス学会学術集会・日本ウイルス学会, 2005, 横浜, 抄録集, 243, 2005
(0522034)
+Maria Inge Lusida, +長野 基子, +森田 加奈子, +笹山 美紀子, 定 清直, +堀田 博: インドネシアのＢ型肝炎ウイルスのgenotype解析とウイルス進化の考察, 第53回日本ウイルス学会学術集会・日本ウイルス学会, 2005, 横浜, 抄録集, 296, 2005
(0522035)
+加藤 誠一, +長野 基子, +大瀧 桃子, +扇本 真治, 定 清直, +堀田 博: 亜急性硬化性全脳炎(SSPE)発症後早期に分離したSSPEウイルスのゲノム構造とウイルス性状の解析, 第53回日本ウイルス学会学術集会・日本ウイルス学会, 2005, 横浜, 抄録集, 319, 2005
0622016
+金 守良, +井本 勉, +谷口 美幸, +金 啓二, +長野 基子, 定 清直, +堀田 博: PEG-IFN+リバビリン併用療法の効果予測における2’-5’オリゴアデニレイト合成酵素(2-5AS)の応答性の検討, 第42回日本肝臓学会総会・日本肝臓学会, 2006.05, 京都, 講演要旨, A218,
2006
0622017
+金 守良, +井本 勉, +堀田 博, +谷口 美幸, +金 啓二, +長野 基子, 定 清直: PEG-IFN+リバビリン併用療法の治療効果予測におけるウイルスdynamicsの検討, 第42回日本肝臓学会総会・日本肝臓学会, 2006.05, 京都, 講演要旨, A221,
2006
0622018
+長野 基子, +堀田 博, +Ahmed El
Shamy, 定 清直, +金 守良, +井本 勉, +婦木 秀一, +金 啓二, +谷口 美幸: ペグインターフェロン／リバビリン併用療法無効例とHCV NS5AのV3領域アミノ酸配列多様性及びNS5A抗体の有無との相関, 第10回日本肝臓学会大会・日本肝臓学会, 2006.10, 札幌, 講演要旨, A400,
2006
0622019
+Ahmed El Shamy, +笹山 美紀子, +長野 基子, +金 守良, 定 清直, +堀田 博: C型肝炎ウイルスNS5Aのアミノ酸配列多様性及び血中NS5A抗体の有無とペグインターフェロン／リバビリン併用療法早期治療効果との相関について, 第54回日本ウイルス学会学術集会・日本ウイルス学会, 2006.11, 名古屋, 抄録集, 269, 2006
0622020
+犬伏 祥子, +長野 基子, +北山 喜久美, 定 清直, +堀田 博: C型肝炎ウイルス感染が非受容体型チロシンキナーゼSykに及ぼす影響, 第54回日本ウイルス学会学術集会・日本ウイルス学会, 2006.11, 名古屋, 抄録集, 259, 2006
0622021
小松 孝行, 竹内 健司, +後藤敏: RSウイルスのインターフェロンアンタゴニズム, 第54回日本ウイルス学会学術集会, 2006.11, 名古屋市
0622022
竹内 健司, 小松 孝行, +後藤敏: センダイウイルスのIFN抵抗性：第三の機構, 第54回日本ウイルス学会学術集会, 2006.11, 名古屋市
(3) 国内学会（地域レベル）
a．一般講演（口演）
0622023
小松 孝行: ヒトRSウイルスのインターフェロン対抗能, 第43回日本細菌学会中部支部総会, 2006.10
b．一般講演（ポスター）
0622024
+Ahmed El Shamy, +笹山 美紀子, +長野 基子, +金 守良, 定 清直, +堀田 博: 慢性C型肝炎に対するペグインターフェロン／リバビリン併用療法早期治療効果とNS5Aのアミノ酸配列多様性および血中NS5A抗体の有無との相関, 第59回日本細菌学会関西支部総会・日本細菌学会関西支部, 2006.10, 高槻, 予稿集, 45, 2006
（C） その他業績
|
·
定 清直: フランス国立衛生医学研究所・フランス難病研究所外部評価員, 2006.04～ |
|
区分 |
研究種目 |
課 題 名 |
代表者名 |
分担者名 |
期 間 （年度） |
金 額 （配分額） |
|
文部科学省科学 研究費補助金 |
基盤研究(C)一般 |
C型肝炎ウイルス蛋白質による肝細胞の蛋白質チロシンリン酸化反応への影響 |
定 清直 |
|
2006 |
2,700千円 |
|
文部科学省科学 研究費補助金 |
基盤研究(C)一般 |
ヒトメタニューモウイルスの病原性とインターフェロンアンタゴニズム |
後藤 敏 |
|
2006 |
1,800千円 |
|
学内競争的資金 |
学長裁量経費・基礎的・萌芽的研究 |
免疫刺激オリゴDNA palGACGA0901のアレルギー・ウィルス感染治療への応用 |
*伊保 澄子 |
竹内健司 |
2006 |
600千円 |
|
学内競争的資金 |
競争的配分経費・研究 |
形質細胞様樹状細胞の活性化とその制御機構の解析 |
*伊保 澄子 |
竹内 健司, 小松 孝行 |
2006 |
500千円 |
（B） 奨学寄附金
|
受入件数 |
1 件 |
|
受入金額 |
91,206 円 |
（A） 国・地域等への貢献
(1) 審議会・委員会・公益法人・会社等への参加状況
|
区分 |
機関・委員会の名称等 |
役職 |
氏名 |
期間 |
|
地方自治体 |
福井県, 福井県結核・感染症予防対策委員会 |
委員 |
木村 吉延 |
2003.02～ |
|
地方自治体 |
福井県衛生環境センター研究課題評価委員会 |
委員 |
木村 吉延 |
2003.08～ |
|
地方自治体 |
福井県衛生環境ｾﾝﾀｰ, 研究課題評価委員会 |
委員 |
木村 吉延 |
2005.08～ |
|
その他 |
福井県, 福井県結核・感染症予防対策委員会 |
委員 |
木村 吉延 |
2005.01～ |
(2) 社会人等への貢献及び学校等との連携・協力による活動
|
区分 |
活動名・活動内容 |
主催者・対象者等 |
氏名 |
|
その他 |
SPP, 微生物学への招待 |
高校生 |
定 清直 |
（B） その他業績
|
·
木村 吉延: Clinical Infectious Diseases, 審査委員,
2005～ |